Il topo GAL8 di specificità e di alta precisione Enzima-ha collegato il corredo di analisi dell'immunosorbente su misura
Cat.No E0860Mo
Gamma standard della curva: 10ng/L - 2000ng/L
Sensibilità: 5.56ng/L
Dimensione: 96 pozzi
Stoccaggio: Immagazzini i reagenti a 2-8°C. per stoccaggio di 6 mesi eccessivo si riferiscono alla data di scadenza lo tengono ai cicli di disgelo ripetuti Avoid di -20°C. Se i diversi reagenti sono aperti è raccomandato che il corredo sia usato entro 1 mese.
il prodotto di *This serve per uso della ricerca soltanto, non nelle procedure di diagnosi. È altamente raccomanda di leggere questa istruzione interamente prima dell'uso.
Procedura di analisi
1. Prepari tutti i reagenti, soluzioni tipo e campioni come istruiti. Porti tutti i reagenti alla temperatura ambiente prima dell'uso. L'analisi è eseguita alla temperatura ambiente.
2. Determini il numero delle strisce richieste per l'analisi. Inserisca le strisce nei telai per uso. Le strisce inutilizzate dovrebbero essere immagazzinate a 2-8°C.
3. Aggiunga bene la norma 50μl alla norma. Nota: Non aggiunga bene l'anticorpo alla norma perché la soluzione tipo contiene l'anticorpo biotinylated.
4. Aggiunga il campione 40μl ai pozzi del campione e poi aggiunga l'anticorpo di 10μl anti-GAL8 ai pozzi del campione, quindi aggiunga lo streptavidin-HRP 50μl ai pozzi del campione ed ai pozzi standard (pozzo di controllo non in bianco). Mescoli bene. Copra il piatto di sigillatore. Incubi 60 minuti a 37°C.
5. Rimuova il sigillatore e lavi il piatto 5 volte con l'amplificatore del lavaggio. Inzuppari i pozzi almeno nell'amplificatore del lavaggio da 0,35 ml per 30 secondi - 1 minuto per ogni lavaggio. Per il lavaggio automatizzato, aspiri tutti i pozzi e lavi 5 volte con l'amplificatore del lavaggio, riempiente troppo scaturisce con l'amplificatore del lavaggio. Macchi il piatto sugli asciugamani di carta o sull'altro materiale assorbente.
6. Aggiunga la soluzione A del substrato 50μl a ciascuno pozzo e poi aggiunga la soluzione B del substrato 50μl a ciascuno bene. Incubi il piatto coperto di nuovo sigillatore per 10 minuti a 37°C nello scuro.
7. Aggiunga 50μl fermano la soluzione a ciascuno bene, il colore blu si trasformerà il giallo immediatamente.
8. Determini la densità ottica (valore del OD) di ciascuno pozzo immediatamente facendo uso di un insieme del lettore del microplate a 450 nanometro all'interno di 10 minuetti dopo l'aggiunta della soluzione di arresto.
Riassunto
1. Prepari tutti i reagenti, campioni e norme.
2. Aggiunga bene il campione ed il reagente di ELISA in ciascuno. Incubi per 1 ora a 37°C.
3. Lavi il piatto 5 volte.
4. Aggiunga la soluzione A e B. Incubate del substrato per 10 minuti a 37°C.
5. Aggiunga fermano la soluzione ed il colore si sviluppa.
6. Legga il valore del OD in 10 minuti.
Reagente fornito
| Componenti |
Quantità |
| Soluzione tipo (2400ng/L) |
0.5ml x1 |
| Piatto ricoperto prima di ELISA |
12 * 8 strisce buone x1 |
| Diluente standard |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Fermi la soluzione |
6ml x1 |
| Soluzione A del substrato |
6ml x1 |
| Soluzione B del substrato |
6ml x1 |
| Concentrato dell'amplificatore del lavaggio (25x) |
20ml x1 |
| Anticorpo del topo GAL8 di Biotinylated |
1ml x1 |
| Istruzione dell'utente |
1 |
| Sigillatore del piatto |
pics 2 |
| Borsa della chiusura lampo |
1 pic |
Materiale richiesto ma non assicurato
- Incubatrice 37°C±0.5°C
- Carta assorbente
- Pipette di precisione e punte eliminabili della pipetta
- Pulisca i tubi
- Deionizzato o acqua distillata
- Lettore di Microplate con 450 il filtro da lunghezza d'onda del ± 10nm
Preparato del reagente
Tutti i reagenti dovrebbero essere portati alla temperatura ambiente prima dell'uso.
La norma ricostituisce il 120μl della norma (2400ng/L) con 120μl di diluente standard per generare una soluzione di azione ordinaria 1200ng/L. Permetta che la norma si sieda per 15 minuti con agitazione delicata prima della fabbricazione delle diluizioni. Prepari i punti standard duplicati in serie diluendo la soluzione di azione ordinaria (1200ng/L) 1:2 con diluente standard per produrre le soluzioni 600ng/L, 300ng/L, 150ng/L e 75ng/L. Il diluente standard serve da norma zero (0 ng/L). Tutta la soluzione restante dovrebbe essere congelata a -20°C ed essere usata entro un mese. La diluizione delle soluzioni tipo suggerite è come segue:
| 1200ng/L |
No.5 standard |
diluente originale di norma 120μl + di norma 120μl |
| 600ng/L |
No.4 standard |
120μl standard diluente di norma No.5 + 120μl |
| 300ng/L |
No.3 standard |
120μl standard diluente di norma No.4 + 120μl |
| 150ng/L |
No.2 standard |
120μl standard diluente di norma No.3 + 120μl |
| 75ng/L |
No.1 standard |
120μl standard diluente di norma No.2 + 120μl |
| Concentrazione standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 2400ng/L |
1200ng/L |
600ng/L |
300ng/L |
150ng/L |
75ng/L |
Amplificatore 20ml diluito del lavaggio del concentrato 25x dell'amplificatore del lavaggio nel deionizzato in o acqua distillata per rendere 500 ml di amplificatore del lavaggio 1x. Se i cristalli si sono formati nel concentrato, miscela delicatamente finché i cristalli completamente non si siano dissolti.
Calcolo del risultato
Costruisca una curva standard tracciando il OD medio per ciascuno standard (y) sull'asse verticale contro la concentrazione (x) sull'asse orizzontale e disegni una la migliore curva di misura attraverso i punti sul grafico. Questi calcoli possono essere eseguiti il più bene con il software computerizzato del curva-montaggio e la migliore linea di misura può essere determinata mediante l'analisi di regressione.
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