Corredo acido fibrillare di ELISA della proteina di Glial del corredo di analisi di ELISA del ratto GFAP con la forti sensibilità e specificità
Ra di Cat.No E0538
Dimensione: 96 pozzi
Stoccaggio: Immagazzini i reagenti a 2-8°C. per stoccaggio di 6 mesi eccessivo si riferiscono alla data di scadenza lo tengono ai cicli di disgelo ripetuti Avoid di -20°C. Se i diversi reagenti sono aperti è raccomandato che il corredo sia usato entro 1 mese.
il prodotto di *This serve per uso della ricerca soltanto, non nelle procedure di diagnosi. È altamente raccomanda di leggere questa istruzione interamente prima dell'uso.
Precauzioni
- Prima di uso, il corredo ed il campione di elisa dovrebbero essere riscaldati naturalmente alla temperatura ambiente 30 minuti.
- Questa istruzione deve essere seguita rigorosamente nell'esperimento.
- Una volta che il numero desiderato delle strisce è stato rimosso, immediatamente risigilli la borsa per proteggere il rimanere da deterioramento. Copra tutti i reagenti quando non in uso.
- Make sure che pipetta ordine e tasso di aggiunta da ben-a-bene quando pipettano i reagenti.
- La pipetta fornisce di punta ed il sigillatore del piatto a disposizione dovrebbe essere pulito ed eliminabile evitare la contaminazione trasversale.
- Eviti usando i reagenti dai lotti differenti insieme.
- La soluzione B del substrato è sensibile a luce, non espone la soluzione B del substrato per accendersi a lungo.
- Fermi la soluzione contiene l'acido. Usi prego la protezione dell'occhio, della mano e della pelle quando usando questo materiale. Eviti il contatto di pelle o delle mucose con il reagente del corredo.
- Il corredo di elisa non dovrebbe essere usato oltre la data di scadenza.
Principio di analisi
Questo corredo di elisa è un'analisi Enzima-collegata dell'immunosorbente (ELISA). Il piatto è stato ricoperto prima con l'anticorpo del ratto GFAP. GFAP presentano nel campione si aggiungono e legano agli anticorpi ricoperti sui pozzi. E l'anticorpo allora biotinylated del ratto GFAP si aggiunge e lega a GFAP nel campione. Poi Streptavidin-HRP si aggiunge e lega all'anticorpo di Biotinylated GFAP. Dopo incubazione Streptavidin-HRP sciolto è lavato via durante il punto di lavaggio. La soluzione del substrato poi si aggiunge ed il colore si sviluppa proporzionalmente alla quantità di ratto GFAP. La reazione è terminata tramite l'aggiunta di acido ferma la soluzione e la capacità di assorbimento è misurata a 450 nanometro.
Uso progettato
Questo corredo del panino è per la rilevazione quantitativa accurata della proteina acida fibrillare di Glial del ratto (anche conosciuta come GFAP) in siero, il plasma, i galleggianti della coltura cellulare, i lysates delle cellule, omogeneati del tessuto.
Reagente fornito
| Componenti |
Quantità |
| Soluzione tipo (2400pg/ml) |
0.5ml x1 |
| Piatto ricoperto prima di ELISA |
12 * 8 strisce buone x1 |
| Diluente standard |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Fermi la soluzione |
6ml x1 |
| Soluzione A del substrato |
6ml x1 |
| Soluzione B del substrato |
6ml x1 |
| Concentrato dell'amplificatore del lavaggio (25x) |
20ml x1 |
| Anticorpo del ratto GFAP di Biotinylated |
1ml x1 |
| Istruzione dell'utente |
1 |
| Sigillatore del piatto |
pics 2 |
| Borsa della chiusura lampo |
1 pic |
Materiale richiesto ma non assicurato
- Incubatrice 37°C±0.5°C
- Carta assorbente
- Pipette di precisione e punte eliminabili della pipetta
- Pulisca i tubi
- Deionizzato o acqua distillata
- Lettore di Microplate con 450 il filtro da lunghezza d'onda del ± 10nm
Preparato del reagente
Tutti i reagenti dovrebbero essere portati alla temperatura ambiente prima dell'uso.
La norma ricostituisce il 120μl della norma (2400pg/ml) con 120μl di diluente standard per generare una soluzione di azione ordinaria 1200pg/ml. Permetta che la norma si sieda per 15 minuti con agitazione delicata prima della fabbricazione delle diluizioni. Prepari i punti standard duplicati in serie diluendo il 1:2 della soluzione di azione ordinaria (1200pg/ml) con il diluente standard per produrre le soluzioni 600pg/ml, 300pg/ml, 150pg/ml e 75pg/ml. Il diluente standard serve da norma zero (0 pg/ml). Tutta la soluzione restante dovrebbe essere congelata a -20°C ed essere usata entro un mese. La diluizione delle soluzioni tipo suggerite è come segue:
| 1200pg/ml |
No.5 standard |
diluente originale di norma 120μl + di norma 120μl |
| 600pg/ml |
No.4 standard |
120μl standard diluente di norma No.5 + 120μl |
| 300pg/ml |
No.3 standard |
120μl standard diluente di norma No.4 + 120μl |
| 150pg/ml |
No.2 standard |
120μl standard diluente di norma No.3 + 120μl |
| 75pg/ml |
No.1 standard |
120μl standard diluente di norma No.2 + 120μl |
| Concentrazione standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 2400pg/ml |
1200pg/ml |
600pg/ml |
300pg/ml |
150pg/ml |
75pg/ml |
Amplificatore 20ml diluito del lavaggio del concentrato 25x dell'amplificatore del lavaggio nel deionizzato in o acqua distillata per rendere 500 ml di amplificatore del lavaggio 1x. Se i cristalli si sono formati nel concentrato, miscela delicatamente finché i cristalli completamente non si siano dissolti.
Riassunto
1. Prepari tutti i reagenti, campioni e norme.
2. Aggiunga bene il campione ed il reagente di ELISA in ciascuno. Incubi per 1 ora a 37°C.
3. Lavi il piatto 5 volte.
4. Aggiunga la soluzione A e B. Incubate del substrato per 10 minuti a 37°C.
5. Aggiunga fermano la soluzione ed il colore si sviluppa.
6. Legga il valore del OD in 10 minuti.
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