Interleuchina su misura 1 rivestito pre- dell'alfa del ratto corredo di ELISA con l'anticorpo dell'IL 1A del ratto

96 alti corredi sensibili di ELISA di pozzi per l'interleuchina del ratto 1 alfa

Cat.No E0118Ra

Gamma standard della curva: 1ng/L - 300ng/L

Sensibilità: 0.48ng/L

Dimensione: 96 pozzi

Stoccaggio: Immagazzini i reagenti a 2-8°C. per stoccaggio di 6 mesi eccessivo si riferiscono alla data di scadenza lo tengono ai cicli di disgelo ripetuti Avoid di -20°C. Se i diversi reagenti sono aperti è raccomandato che il corredo sia usato entro 1 mese.

* questo prodotto serve per uso della ricerca soltanto, non nelle procedure di diagnosi. È altamente raccomanda di leggere questa istruzione interamente prima dell'uso.

Uso progettato

Questo corredo del panino è per la rilevazione quantitativa accurata dell'interleuchina del ratto 1 alfa (anche conosciuta come IL-1A) in siero, il plasma, i galleggianti della coltura cellulare, i lysates delle cellule, omogeneati del tessuto.

Principio di analisi

Questo corredo è un'analisi Enzima-collegata dell'immunosorbente (ELISA). Il piatto è stato ricoperto prima con l'anticorpo del ratto IL-1A. IL-1A presentano nel campione si aggiungono e legano agli anticorpi ricoperti sui pozzi. E l'anticorpo allora biotinylated del ratto IL-1A si aggiunge e lega a IL-1A nel campione. Poi Streptavidin-HRP si aggiunge e lega all'anticorpo di Biotinylated IL-1A. Dopo incubazione Streptavidin-HRP sciolto è lavato via durante il punto di lavaggio. La soluzione del substrato poi si aggiunge ed il colore si sviluppa proporzionalmente alla quantità di ratto IL-1A. La reazione è terminata tramite l'aggiunta di acido ferma la soluzione e la capacità di assorbimento è misurata a 450 nanometro.

Precauzioni

• Prima di uso, il corredo ed il campione dovrebbero essere riscaldati naturalmente alla temperatura ambiente 30 minuti.
• Questa istruzione deve essere seguita rigorosamente nell'esperimento.
• Una volta che il numero desiderato delle strisce è stato rimosso, immediatamente risigilli la borsa per proteggere il rimanere da deterioramento. Copra tutti i reagenti quando non in uso.
• Make sure che pipetta ordine e tasso di aggiunta da ben-a-bene quando pipettano i reagenti.
• La pipetta fornisce di punta ed il sigillatore del piatto a disposizione dovrebbe essere pulito ed eliminabile evitare la contaminazione trasversale.
• Eviti usando i reagenti dai lotti differenti insieme.
• La soluzione B del substrato è sensibile a luce, non espone la soluzione B del substrato per accendersi a lungo.
• Fermi la soluzione contiene l'acido. Usi prego la protezione dell'occhio, della mano e della pelle quando usando questo materiale. Eviti il contatto di pelle o delle mucose con il reagente del corredo.
• Il corredo non dovrebbe essere usato oltre la data di scadenza.

Amplificatore 20ml diluito del lavaggio del concentrato 30x dell'amplificatore del lavaggio nel deionizzato in o acqua distillata per rendere 500 ml di amplificatore del lavaggio 1x. Se i cristalli si sono formati nel concentrato, miscela delicatamente finché i cristalli completamente non si siano dissolti.

Procedura di analisi

1. Prepari tutti i reagenti, soluzioni tipo e campioni come istruiti. Porti tutti i reagenti alla temperatura ambiente prima dell'uso. L'analisi è eseguita alla temperatura ambiente.

2. Determini il numero delle strisce richieste per l'analisi. Inserisca le strisce nei telai per uso. Le strisce inutilizzate dovrebbero essere immagazzinate a 2-8°C.

3. Aggiunga bene la norma 50μl alla norma. Nota: Non aggiunga bene l'anticorpo alla norma perché la soluzione tipo contiene l'anticorpo biotinylated.

4. Aggiunga il campione 40μl ai pozzi del campione e poi aggiunga l'anticorpo di 10μl anti-IL-1A ai pozzi del campione, quindi aggiunga lo streptavidin-HRP 50μl ai pozzi del campione ed ai pozzi standard (pozzo di controllo non in bianco). Mescoli bene. Copra il piatto di sigillatore. Incubi 60 minuti a 37°C.

5. Rimuova il sigillatore e lavi il piatto 5 volte con l'amplificatore del lavaggio. Inzuppari i pozzi almeno nell'amplificatore del lavaggio da 0,35 ml per 30 secondi - 1 minuto per ogni lavaggio. Per il lavaggio automatizzato, aspiri tutti i pozzi e lavi 5 volte con l'amplificatore del lavaggio, riempiente troppo scaturisce con l'amplificatore del lavaggio. Macchi il piatto sugli asciugamani di carta o sull'altro materiale assorbente.

6. Aggiunga la soluzione A del substrato 50μl a ciascuno pozzo e poi aggiunga la soluzione B del substrato 50μl a ciascuno bene. Incubi il piatto coperto di nuovo sigillatore per 10 minuti a 37°C nello scuro.

7. Aggiunga 50μl fermano la soluzione a ciascuno bene, il colore blu si trasformerà il giallo immediatamente.

8. Determini la densità ottica (valore del OD) di ciascuno pozzo immediatamente facendo uso di un insieme del lettore del microplate a 450 nanometro all'interno di 10 minuetti dopo l'aggiunta della soluzione di arresto.

Riferimenti

Westphal E., Li Chen, Pilowski C., Koch S., Ebelt H., muller-Werdan U., Werdan K., Loppnow H.
J. Endotoxin Res. 13:25 - 34(2007)