48 pozzi/96 corredi umani di ELISA di pozzi, interpongono il corredo umano di ELISA di leptina

96 alti corredi sensibili di ELISA di pozzi per il LEP umano

Cat.No EHu1559

Gamma standard della curva: 0.05ng/ml - 10ng/ml

Sensibilità: 0.021ng/ml

Dimensione: 96 pozzi

Stoccaggio: Immagazzini i reagenti a 2-8°C. per stoccaggio di 6 mesi eccessivo si riferiscono alla data di scadenza lo tengono ai cicli di disgelo ripetuti Avoid di -20°C. Se i diversi reagenti sono aperti è raccomandato che il corredo sia usato entro 1 mese.

* questo prodotto serve per uso della ricerca soltanto, non nelle procedure di diagnosi. È altamente raccomanda di leggere questa istruzione interamente prima dell'uso.

Precisione

La precisione di Intra-analisi (precisione all'interno di un'analisi) tre campioni di concentrazione conosciuta è stata provata su un piatto per valutare la precisione di intra-analisi.

La precisione di Inter analisi (precisione fra le analisi) tre campioni di concentrazione conosciuta è stata provata nelle analisi separate per valutare la precisione di inter analisi.

Cv (%) = SD/mean x 100

Intra-analisi: Cv<8>

Inter analisi: Cv<10>

Uso progettato

Questo corredo del panino è per la rilevazione quantitativa accurata della leptina umana (anche conosciuta come il LEP) in siero, il plasma, i galleggianti della coltura cellulare, i lysates delle cellule, omogeneati del tessuto.

Reagente fornito

Nota

• Le concentrazioni del campione dovrebbero essere prevedute prima di essere utilizzato nell'analisi. Se la concentrazione del campione non è all'interno della gamma della curva standard, gli utenti devono contattarci per determinare il campione ottimale per i loro esperimenti particolari.
• I campioni da usare nei 5 giorni dovrebbero essere immagazzinati ai campioni 2-8°C. dovrebbero essere aliquoted o devono essere immagazzinati a -20°C entro 1 mese o a -80°C entro 6 mesi. Avoid ha ripetuto i cicli di gelo-disgelo.
• I campioni dovrebbero essere portati alla temperatura ambiente prima di iniziare l'analisi.
• Centrifuga per raccogliere campione prima dell'uso.
• I campioni che contengono NaN3 non possono essere provati mentre inibisce l'attività della perossidasi (HRP) del rafano.
• Raccolga con attenzione i surnatanti. Quando i sedimenti si sono presentati durante lo stoccaggio, la centrifugazione dovrebbe essere ripetuta.
• L'emolisi può notevolmente urtare la validità dei risultati dei test. Ciao per minimizzare l'emolisi.

Procedura di analisi

1. Prepari tutti i reagenti, soluzioni tipo e campioni come istruiti. Porti tutti i reagenti alla temperatura ambiente prima dell'uso. L'analisi è eseguita alla temperatura ambiente.
2. Determini il numero delle strisce richieste per l'analisi. Inserisca le strisce nei telai per uso. Le strisce inutilizzate dovrebbero essere immagazzinate a 2-8°C.
3. Aggiunga bene la norma 50μl alla norma. Nota: Non aggiunga bene l'anticorpo alla norma perché la soluzione tipo contiene l'anticorpo biotinylated.
4. Aggiunga il campione 40μl ai pozzi del campione e poi aggiunga l'anticorpo del anti-LEP 10μl ai pozzi del campione, quindi aggiunga lo streptavidin-HRP 50μl ai pozzi del campione ed ai pozzi standard (pozzo di controllo non in bianco). Mescoli bene. Copra il piatto di sigillatore. Incubi 60 minuti a 37°C.
5. Rimuova il sigillatore e lavi il piatto 5 volte con l'amplificatore del lavaggio. Inzuppari i pozzi almeno nell'amplificatore del lavaggio da 0,35 ml per 30 secondi - 1 minuto per ogni lavaggio. Per il lavaggio automatizzato, aspiri tutti i pozzi e lavi 5 volte con l'amplificatore del lavaggio, riempiente troppo scaturisce con l'amplificatore del lavaggio. Macchi il piatto sugli asciugamani di carta o sull'altro materiale assorbente.
6. Aggiunga la soluzione A del substrato 50μl a ciascuno pozzo e poi aggiunga la soluzione B del substrato 50μl a ciascuno bene. Incubi il piatto coperto di nuovo sigillatore per 10 minuti a 37°C nello scuro.
7. Aggiunga 50μl fermano la soluzione a ciascuno bene, il colore blu si trasformerà il giallo immediatamente.
8. Determini la densità ottica (valore del OD) di ciascuno pozzo immediatamente facendo uso di un insieme del lettore del microplate a 450 nanometro all'interno di 10 minuetti dopo l'aggiunta della soluzione di arresto.

Riferimenti

Comings D.E., Gade R., Muhleman D., Peters W.R., MacMurray J.P.
Mol. Genet. Metab. 73:204- 210(2001)