Pozzi del corredo 96 di ELISA di Adiponectin dell'essere umano di sensibilità e di alta specificità
Cat.No EHu1550
Dimensione: 96 pozzi
Stoccaggio: Immagazzini i reagenti a 2-8°C. per stoccaggio di 6 mesi eccessivo si riferiscono alla data di scadenza lo tengono ai cicli di disgelo ripetuti Avoid di -20°C. Se i diversi reagenti sono aperti è raccomandato che il corredo sia usato entro 1 mese.
* questo prodotto serve per uso della ricerca soltanto, non nelle procedure di diagnosi. È altamente raccomanda di leggere questa istruzione interamente prima dell'uso.
Uso progettato
Questo corredo del panino è per la rilevazione quantitativa accurata dell'essere umano Adiponectin (anche conosciuto come l'ADP) in siero, il plasma, i galleggianti della coltura cellulare, i lysates delle cellule, omogeneati del tessuto.
Precisione
La precisione di Intra-analisi (precisione all'interno di un'analisi) tre campioni di concentrazione conosciuta è stata provata su un piatto per valutare la precisione di intra-analisi.
La precisione di Inter analisi (precisione fra le analisi) tre campioni di concentrazione conosciuta è stata provata nelle analisi separate per valutare la precisione di inter analisi.
Cv (%) = SD/mean x 100
Intra-analisi: Cv<8>
Inter analisi: Cv<10>
Raccolta di esemplare
Il siero permette che il siero si coaguli per 10-20 minuti alla temperatura ambiente. Centrifuga a 2000-3000 giri/min. per 20 minuti.
Il plasma raccoglie il plasma facendo uso degli ED o dell'eparina come anticoagulante. Centrifughi i campioni per 15 minuti a 2000-3000 giri/min. a 2 - 8°C in 30 minuti della raccolta.
L'urina si raccoglie dal tubo sterile. Centrifuga a 2000-3000 giri/min. per circa 20 minuti. Nel raccogliere il liquido fluido e cerebrospinale pleuroperitoneal, segua prego le procedure suddette.
Il surnatante della coltura cellulare si raccoglie dai tubi sterili quando esaminano secerni le componenti. Centrifughi a 2000-3000 giri/min. per circa 20 minuti. Raccolga con attenzione i surnatanti. Nell'esaminare le componenti all'interno della cellula, usi PBS (pH 7.2-7.4) per diluire la sospensione delle cellule alla concentrazione nelle cellule di circa 1 million/ml. Danneggi le cellule durante i cicli di gelo-disgelo ripetuti per terminare le componenti interne. Centrifughi a 2000-3000 giri/min. per circa 20 minuti.
Tessuti del risciacquo del tessuto in PBS (pH 7,4) per rimuovere completamente sangue in eccesso e da pesare prima di omogeneizzazione. Triti i tessuti ed omogeneizzili in PBS (pH7.4) con un omogeneizzatore di vetro su ghiaccio. Sciolga a 2-8°C o congeli alla centrifuga di -20°C. a 2000-3000 giri/min. per circa 20 minuti.
Noti
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Le concentrazioni del campione dovrebbero essere prevedute prima di essere utilizzato nell'analisi. Se la concentrazione del campione non è all'interno della gamma della curva standard, gli utenti devono contattarci per determinare il campione ottimale per i loro esperimenti particolari.
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I campioni da usare nei 5 giorni dovrebbero essere immagazzinati ai campioni 2-8°C. dovrebbero essere aliquoted o devono essere immagazzinati a -20°C entro 1 mese o a -80°C entro 6 mesi. Avoid ha ripetuto i cicli di gelo-disgelo.
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I campioni dovrebbero essere portati alla temperatura ambiente prima di iniziare l'analisi.
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Centrifuga per raccogliere campione prima dell'uso.
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I campioni che contengono NaN3 non possono essere provati mentre inibisce l'attività della perossidasi (HRP) del rafano.
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Raccolga con attenzione i surnatanti. Quando i sedimenti si sono presentati durante lo stoccaggio, la centrifugazione dovrebbe essere ripetuta.
il *Sample non può essere diluito con questo corredo. A causa del materiale usiamo per preparare il corredo, l'interferenza di matrice del campione può diminuire erroneamente la specificità e l'accuratezza dell'analisi.
Preparato del reagente
La norma ricostituisce il 120μl della norma (64mg/L) con 120μl di diluente standard per generare una soluzione di azione ordinaria 32mg/L. Permetta che la norma si sieda per 15 minuti con agitazione delicata prima della fabbricazione delle diluizioni. Prepari i punti standard duplicati in serie diluendo la soluzione di azione ordinaria (32mg/L) 1:2 con diluente standard per produrre le soluzioni 16mg/l, 8mg/L, 4mg/L e 2mg/L. Il diluente standard serve da norma zero (0 mg/l). Tutta la soluzione restante dovrebbe essere congelata a -20°C ed essere usata entro un mese. La diluizione delle soluzioni tipo suggerite è come segue:
| 32mg/L |
No.5 standard |
diluente originale di norma 120μl + di norma 120μl |
| 160mg/L |
No.4 standard |
120μl standard diluente di norma No.5 + 120μl |
| 8mg/L |
No.3 standard |
120μl standard diluente di norma No.4 + 120μl |
| 4mg/L |
No.2 standard |
120μl standard diluente di norma No.3 + 120μl |
| 2mg/L |
No.1 standard |
120μl standard diluente di norma No.2 + 120μl |
| Concentrazione standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 64mg/L |
32mg/L |
16mg/L |
8mg/L |
4mg/L |
2mg/L |
Amplificatore 20ml diluito del lavaggio del concentrato 25x dell'amplificatore del lavaggio nel deionizzato in o acqua distillata per rendere 500 ml di amplificatore del lavaggio 1x. Se i cristalli si sono formati nel concentrato, miscela delicatamente finché i cristalli completamente non si siano dissolti.
Riassunto
1. Prepari tutti i reagenti, campioni e norme.
2. Aggiunga bene il campione ed il reagente di ELISA in ciascuno. Incubi per 1 ora a 37°C.
3. Lavi il piatto 5 volte.
4. Aggiunga la soluzione A e B. Incubate del substrato per 10 minuti a 37°C.
5. Aggiunga fermano la soluzione ed il colore si sviluppa.
6. Legga il valore del OD in 10 minuti.
Riferimenti
Waki H., Yamauchi T., Kamon J., Ito Y., Uchida S., Kita S., Hara K., Hada Y., Vasseur F., Froguel P., Kimura S., Nagai R., Kadowaki T.
J. Biol. chim. 278:40352- 40363(2003)
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